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上海航栋科学仪器设备有限公司
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供应Celetrix电转仪(细胞电穿孔仪) |
Celetrix电转仪(细胞电穿孔仪)
1500A-EX电转仪,*大转染体积1000uL.
电转染,*关心的是什么?
1.转染效率
2.细胞死亡率
 
对一批同样的细胞,性质相似,为什么有的细胞顺利转入了 DNA, 有的细胞没有得到DNA.,有的细胞电转后活的好好的,有的就被‘电死’了。
 
从电转仪的角度来讲,
如果电转染时候每个细胞受到的电压相同,电击时间相同,毫无疑问,通过调节电击电压,电击时间,可以得到一个较高的转染效率和较低的细胞死亡率。
 
问题是,传统的电击杯,宏观上可以控制电转仪每次电击时间和电压相同,但微观上,电击杯里面不同位置的细胞分到的电压相同吗。
答案是否定的。且将电击杯里的小世界放大了分析。
 
1.电击杯液面部分
 电极杯内由于液体表面张力的作用,液面不平,导致对液体内部电压分配的均匀度有很大的影响。电压分配可以用一个简化的等效电路来说明。电极杯内液体可以分割成相同的部分,每个部分电阻相同多路先串联再并联,每一路两端总电压相等。
液面翘角处,相当于电阻先并联后再串联入电路,此处阻值变小,在电路中分压变小(如右图 ),细胞电压不够不能电转。由于两端总电压相同,多出来的电压分到液体凹面下方的区间,导致此处电压过高(如右图),细胞死亡。
结论:电极杯里靠近液面的部分细胞分配到的电压相差较大。
 
2.靠近电极部分
电极杯中样品与电极接触面积大,电化学反应产生毒性物质多,并且产生非常多的气泡。气泡对电转的实际影响非常大。
由于气泡是绝缘体,电流只能从气泡之间的间隙溶液流过,这样导致气泡间隙的溶液中电流富集升高,处于其中的细胞因承受太高的电压而死亡。气泡作为一个球形绝缘体,可以扭曲周围电流的走向。气泡侧面(气泡间隙溶液)电流变大,而气泡的前后两方都是低电流区,处于此区的细胞得到电压不够,不能电转。见右图。
 
小结:
电极杯内的溶液上方受到液面效应 影响,电场不均匀。靠近两个电极1-2mm的区域由于气泡的作用,电场也不均匀。电极杯内电场比较均匀的较优电转区域很小(右图蓝色部分),而1mm或者2mm电极杯甚至可能没有较优电转区域。
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